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技術文章

組織培養前實驗室設計

2021-02-10 11:02:44

  在進行植物組織培養工作之前,首先應對工作中需要哪些最基本的設備條件有個全面的了解,以便因地制宜地利用現有房屋,或新建、改建實驗室。實驗室的大小取決于工作的目的和規模。以工廠化生產為目的,實驗室規模太小,則會限制生產,影響效率。在設計組織培養實驗室時,應按組織培養程序來沒計,避免某些環節倒排,引起日后工作混亂。植物組織培養是在嚴格無菌的條件下進行的。要做到無菌的條件,需要一定的設備、器材和用具,同時還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養條件。

  實驗室設計原則:保證無菌操作,達到工作方便,防止污染。

  實驗室組成:化學實驗室、洗滌菌室、無菌操作室(接種室)、培養室、細胞學實驗室、其他小型儀器設備。

  1) 化學實驗室(準備室):完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、配制、培養基分裝等。

  主要設備:藥品柜、防塵櫥(放置培養容器)、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養基配制用玻璃儀器.

  2) 洗滌、滅菌室:完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養基的滅菌等。

  主要設備:水池、操作臺、高壓滅菌鍋、干燥滅菌器(如烘箱)等。

  3) 無菌操作室(接種室):主要用于植物材料的消毒、接種、培養物的轉移、試管苗的繼代、原生質體的制備以及一切需要進行無菌操作的技術程序。

  主要設備:紫外光源、超凈工作臺、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針)等。

  接種室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒。配置拉動門,以減少開關門時的空氣擾動。接種室要求干爽安靜,清潔明亮。在適當位置吊裝1~2盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。最好安裝一小型空調,使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對流。接種室應設有緩沖問,面積1m2為宜。進入無菌操作室前在此更衣換鞋,以減少進出時帶入接種室雜菌。緩沖間最好也安一盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。

  4) 培養室:培養室是將接種的材料進行培養生長的場所。培養室的大小可根據需要培養架的大小、數目、及其他附屬設備而定。其設計以充分利用空間和節省能源為原則。高度比培養架略高為宜,周圍墻壁要求有絕熱防火的性能。

  培養材料放在培養架上培養。培養架大多由金屬制成,一般設5層,最低一層離地高約lOcm,其他每層間隔30cm左右,培養架即高1.7m左右。培養架長度都是根據日光燈的長度而設計,如采用40W日光燈,則長1.3m,30W的長lm,寬度一般為60cm。

  培養室最重要的因子是溫度,一般保持在20—27℃左右,具備產熱裝置,并安裝窗式或立式空調機。由于熱帶植物和寒帶植物等不同種類要求不同溫度,最好不同種類有不同的培養室。

  室內濕度也要求恒定,相對濕度以保持在70%~80%為好,可安裝加濕器。控制光照時間可安裝定時開關鐘,一般需要每天光照10-16h,也有的需要連續照明。短日照植物需要短日照條件,長日照植物需要長日照條件。現代組培實驗室大多設計為采用天然太陽光照作為主要能源,這樣不但可以節省能源,而且組培苗接受太陽光生長良好,馴化易成活。在陰雨天可用燈光作補充。

  主要設備:培養架(控溫控光控濕)、搖床、培養箱、紫外光源等。

  5) 細胞學實驗室:用于對培養物的觀察分析與培養物的計數等。主要設備:雙筒實體顯微鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。

  6) 其他小型儀器設備:分注器、血球計數器、移液槍、過濾滅菌器、電爐等加熱器具、磁力攪拌器、低速臺式離心機等。

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